Post mortem investigation of Inherited Metabolic Disease - the last - PowerPoint PPT Presentation

Post mortem investigation of Inherited Metabolic Disease - the last opportunity for a diagnosis - Dr Simon Olpin Lead Clinical Scientist in Inherited Metabolic Disease Sheffield Children’s Hospital

SIDS/SUDI � ���������������������������� � ��������������������������������������� � �������������������������������������� ��� �������� � !"#������������������������������������

Metabolic causes of SIDS � $���������������������������� � �%&%�'()* � +�������������������� � �%&%�,-( � ,�&�������������� � �%&%�'').��).��/) � (��&����������������������� � �%&%��*0.�������������������������� � (���������������������� � �%&%�&������������.�12*�������

How can we investigate possible IEM after death? � +�����" ,�&���������� � 3�����������%&%�45,06��������� � )���������������������&����'27'2� � *82� � 8��� � (2$ � $����������������� � *9)�: ���������������������

Acylcarnitines: key diagnostic metabolites Acylcarnitines: key diagnostic metabolites Acylcarnitines: key diagnostic metabolites Acylcarnitines: key diagnostic metabolites Acylcarnitines: key diagnostic metabolites Acylcarnitines: key diagnostic metabolites Acylcarnitines: key diagnostic metabolites Acylcarnitines: key diagnostic metabolites � )����������������������)���"(�)� �����������&� ����������������������������;�: ����������� ������������������������������������������ ������������% ACYL - CoA + carnitine ACYL - carnitine + CoA ENZYME � ������������������������������������.�������.������<�(2$ � 0����������������&��������������������������������=����" 1(.� 0�>(.�1('2�?@!������ ����������A�" $)8"'27'2�5�BB��6.�� ���������3����������� 532�"'27'26 5������ ����������6

QuattroLC MS/MS

‘Parents of 85’ .. quantitative profile by stable isotope dilution (8 internal standards*). OUTPUT MS2 – fixed-focus on m/z 85 SIGNAL MS1 - SCAN m/z 200 - 520

‘Parents of 85’ .. quantitative profile by stable isotope dilution. d3-C0 =37µM 8 stable isotopically labelled C2 C2 C2 C2 Acylcarnitines added as ‘Internal Standards’ d3-C2 C0 C0 C0 C0 = 9.2µM d3-C16 =3.7µM d9-C5 d3-C8 =1.8µM =1.8µM d3-C3&4 d9-C14 = 1.8µM =1.8µM C16 C16 C18:1 C18:1 C16 C16 C18:1 C18:1 C4DC C4DC C4DC C4DC C3 C3 C3 C3 C5- C5 -OH OH C12 C12 C5 C5 - - OH OH C12 C12 C4 C4 C4 C4

How can we investigate after death? � (��������&���&������&����������������� �����������" � 9��������7�������;�������'� � ���������&����������7��������������������'*� � �%&%������������������������������������� � ������"�����������������&&�����'* � $���������� � $���������� � )���������������������& � 2����������C������������%&%�1)�

Establishing Normal Post Mortem Reference Ranges for acylcarnitines � /��������������������������������������� � ,������&���������4����������� � (���� �����������5+2)�<�(�����6 � 8+-� � >�����������������������������������D��������E� ���&����� � 3���������" '()*

Chace et al 2001 (US & Canada) � 3������������������������&������������&����� ����������������������(��: (�#� � ���*82�<�!������������ � /����F�����������������&���5 µ ���7>6 � ( �����%��"�%�!������*8* � ( �����%G4�: �G���������� � (��������*82�����9�F�������������&��( ��H��%! � )������&&��������������&�������������� � �%&%�( 7(������'()*.�(�G��7(��������/>()*

Chace et al - Findings � ##�������������&&�������������������������� � �!�'()*�5��������������������������6 � B�/>()*�5����"���&�����������"(�)6 � � '������������"(�) �������&���������������� 5')**6 � #�(�-��7�()(-� 5��������������������������������������6 � G����������������������������� � G�>(0)*7-$��5 >��&"������!"�����������"(�)��������&�����6 � !�&������� ��������� �������51)�6 � G�����������"(�) �������&���������������� � ��'')7�).�'2+*

Data from Sheffield/Bristol/Leicester � ���G�:���4 � ������'�*�����8�����2���� � �G��8����������� � ����(2$��������

Post mortem reference ranges ���������� ��� ���������� ���� �������� �������� �������������� �������������� �� ���� ! �������� ������� "#���� ������� ������ �# � ��$�� ������� ������� �#��"� ������� ������� � ��" ������� ������ ���" ������� ������ ��%� #�#& ������� ����� #��& ������� ����� ��'() #�"� ������� ���� #���� ������� ����� �& #��& ������� ����� #��" ���� ������ ��#%� #�#� ������� ����� #��$ ���� ����� ��# #�� ������� ����� #���$ ���� ������ ��'�� #��� ������� ����� #� # ���� ���� �� %� #�#$ ������� ����� #�"�� ������� ������ �� #��& ������� ����� #�"� ������� ����� ��� #�! ������ ����� #��# ������� ����� ���'() #�# � ������� ����� #���� ������� ����� ��&%� #�!$ ������� ����� #�!#� ������� ����� �&*��# ���"� ������� ���� #�&#� ���� �����