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iDifferen'ate A Tool for the Advancement of Stem Cell - PowerPoint PPT Presentation

Jun 03, 2023 •214 likes •421 views

iDifferen'ate A Tool for the Advancement of Stem Cell Applica5ons Members present: Nick Goldner Rachel Nolte Logan Friedrich Stem cells

  1. iDifferen'ate ¡ A ¡Tool ¡for ¡the ¡Advancement ¡of ¡ Stem ¡Cell ¡Applica5ons ¡ ¡ Members ¡present: ¡ Nick ¡Goldner ¡ Rachel ¡Nolte ¡ Logan ¡Friedrich ¡ ¡

  2. Stem ¡cells ¡ • Mul5potent ¡ • Pluripotent ¡ • Embryonic ¡ • IPS ¡

  3. iDifferen'ate ¡ The ¡fundamental ¡model ¡ ¡ Mul'ple ¡cell ¡lineage ¡assays ¡ Assay ¡specific ¡analysis ¡tools ¡ Integrate ¡wetware ¡and ¡ so;ware ¡ Expedite ¡bench-­‑top ¡to ¡bed-­‑ side ¡transi'on ¡ ¡

  4. Leukocytes ¡ CNS ¡Tissue ¡ iDifferen'ate ¡ PlaKorm ¡ Endoderm, ¡Mesoderm, ¡Ectoderm ¡ SAVE ¡Assay: ¡Cardiomyocytes ¡

  5. The ¡SAVE ¡Assay ¡ (Selec'on ¡of ¡Atrial ¡and ¡Ventricular ¡cardiomyocytes ¡through ¡Engineering) ¡ What ¡are ¡our ¡short-­‑term ¡goals ¡for ¡this ¡project? ¡ Design ¡and ¡produce ¡SAVE ¡assay ¡plasmids ¡ Transfect ¡Stem ¡Cells ¡ ¡ ¡ Induced ¡differen'a'on ¡ ¡ Atrial ¡cells ¡fluoresce ¡green, ¡and ¡ventricular ¡ cells ¡fluoresce ¡cyan. ¡ Analyze ¡

  6. SAVE ¡Assay ¡Plasmid ¡Maps ¡ ANF+eGFP+Puromycin ¡ MLC2V+eCFP+Neomycin ¡ (Indicates ¡Atrial ¡Cell) ¡ (Indicates ¡Ventricle ¡Cells) ¡

  7. 123456 ¡ The ¡SAVE ¡Assay ¡ ¡ What ¡are ¡our ¡long-­‑term ¡goals ¡for ¡this ¡project? ¡ Engineer ¡a ¡eukaryo'c ¡ selec'on ¡resistant ¡feeder ¡ layer. ¡ Design ¡assay ¡specific ¡analysis ¡ tools. ¡ Package ¡into ¡a ¡commercially ¡ viable ¡product. ¡

  8. The ¡iDifferen'ate ¡plaKorm ¡will ¡reduce… ¡ labor ¡intensity. ¡ 'me ¡required. ¡ expense. ¡ the ¡use ¡of ¡hazardous ¡chemicals. ¡ passage ¡number. ¡

  9. Tradi5onal ¡Method ¡ ¡ ¡ ¡

  10. Methods ¡ Plasmid ¡Engineering ¡ ¡ Dilu'on ¡Plate ¡ Transform ¡competent ¡ ¡cells ¡with ¡ Plasmid ¡

  11. Methods ¡ Plasmid ¡Engineering ¡ ¡ Plasmid ¡Purifica'on ¡ Grow ¡up ¡in ¡LB ¡

  12. Methods ¡ Plasmid ¡Engineering ¡ ¡ Restric'on ¡ Enzyme ¡ Diges'on ¡ Gel ¡Characteriza'on ¡

  13. Methods ¡ Plasmid ¡Engineering ¡ ¡ DNA ¡Extrac'on ¡ Liga'on ¡ From ¡Gel ¡ ¡

  14. Methods ¡ Plasmid ¡Engineering ¡ ¡ Gel ¡Characteriza'on ¡ Transforma'on ¡

  15. Methods ¡ Cell ¡Culture ¡ ¡ Plate ¡Stem ¡Cells ¡ ¡ Form ¡Ca5onic ¡Lipids ¡ Plasmid ¡Complex ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ Ca5onic ¡lipids ¡are ¡ ¡ conjugated ¡to ¡SAVE ¡ ¡ plasmids ¡ ¡ ¡ Obtain ¡Stem ¡Cells ¡

  16. Methods ¡ Cell ¡Culture ¡ ¡ Induce ¡ Differen5a5on ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ Transfect ¡Stem ¡Cell ¡with ¡ Select ¡for ¡Successful ¡ SAVE ¡Plasmids ¡ Transfec5on ¡ ¡ ¡

  17. Methods ¡ Cell ¡Culture ¡ ¡ Analyze ¡fluorescence ¡ via ¡microscopy ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ Characteriza5on ¡and ¡ Screening ¡of ¡Novel ¡ Induc5ve ¡Agents ¡

  18. ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ Any ¡Ques5ons? ¡

  19. Future ¡Direc5ons ¡ iPure ¡ • In-­‑vivo ¡nega've ¡cell ¡selec'on ¡for ¡ misdifferen'a'on ¡and ¡nondifferen'a'on ¡ of ¡stem ¡cells ¡ ¡ ¡ iPharm ¡ • Pure ¡cell ¡type ¡specific ¡cultures ¡for ¡drug ¡ tes'ng ¡ ¡ • Personalized ¡medica'on ¡screening ¡ ¡

  20. ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡ ¡Meet ¡the ¡WLC ¡iGEM ¡Team ¡ Nick ¡Goldner ¡ Team ¡Manager ¡ Dr. ¡Robert ¡Balza ¡ Research ¡Coordinator ¡ Logan ¡Friedrich ¡ Faculty ¡Team ¡Leader ¡ Lab ¡Lackie ¡ Research ¡Lackie ¡ Vince ¡Jacobson ¡ Michelle ¡Hasse ¡ Ethicist ¡ Lead ¡Engineer ¡ Rachel ¡Nolte ¡ Lab ¡Manager ¡ Steve ¡Van ¡Alstein ¡ Research ¡Lackie ¡

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